文献类型：期刊文献

中文题名：新疆杨胰蛋白酶抑制剂基因的克隆与表达

英文题名：The Cloning and Functional Expression of a Kunitz Trypsin Inhibitor Gene from Populus alba var.pyramidalis

作者：梁文星[1] 范在丰[1] 李永[2] 宋丽敏[1] 李怀方[1] 田国忠[2]

第一作者：梁文星

机构：[1]中国农业大学植物病理系;[2]中国林业科学研究院森林生态环境和保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室

年份：2006

卷号：19

期号：4

起止页码：446-451

中文期刊名：林业科学研究

外文期刊名：Forest Research

收录：CSTPCD;;Scopus;北大核心:【北大核心2004】；CSCD:【CSCD2011_2012】；

基金：国家重点基础研究发展规划项目"树木育种的分子基础研究"(973项目)(G1999016003)

语种：中文

中文关键词：蛋白酶抑制剂基因;新疆杨;损伤诱导

外文关键词：trypsin inhibitor （TI） gene; Populus alba var. pyramidalis; wound inducement

分类号：S792.11

摘要：杨树受损伤后能诱导一些基因的表达,其编码的蛋白质可能在杨树的防卫反应中起一定作用。用PCR方法从新疆杨叶片中克隆出一个损伤诱导型Kun itz胰蛋白酶抑制剂基因PaTI1。序列分析表明:此基因不含内含子,其翻译起点上游具有‘TATA’和‘CCAAT’等转录控制元件,包含的阅读框架能编码一个长为213个氨基酸的多肽。此多肽与克隆自美洲山杨的PtTI2和PtTI1氨基酸序列同源性最高,分别为95%和80%,其N端存在一长度为27个氨基酸的信号肽。将此基因以融合蛋白的形式在大肠杆菌中进行表达,纯化后的融合蛋白对胰蛋白酶的活性有抑制作用,每8.5μg融合蛋白可完全抑制1μg牛胰蛋白酶的活性。W estern b lot分析表明融合蛋白与PtTI2特异的抗体之间有明显的血清学反应。
Wounding of poplar trees leads to the accumulation of several mRNA species that encode proteins with putative defensive function. A Kuntiz trypsin inhibitor gene was isolated from Populus alba var. pyramidalis by RT-PCR. The gene was expressed in E. coli as recombinant protein and its product was shown to have inhibitor activity to trypsin in vitro. No evident affinity was found between the recombinant protein and bovine trypsin. Western blotting analysis showed that the recombinant protein could strongly recognize the antibody specifically for PtTI2 from trembling aspen.