文献类型：专利

中文题名：基于西南桦叶片不定根发生的遗传转化方法

作者：王欢[1] 王春胜[1] 郭俊杰[1] 尹海锋[1] 曾杰[1]

第一作者：王欢

机构：[1]中国林业科学研究院热带林业研究所;

专利类型：发明专利

申请号：CN202310543768.2

申请日：20230515

申请人地址：510665 广东省广州市天河区广汕一路682号

公开日：20230718

代理人：李美

代理机构：华进联合专利商标代理有限公司

语种：中文

中文关键词：叶片;转化受体;清洗;不定根发生;根癌农杆菌;遗传转化;预培养;侵染;增强绿色荧光蛋白;根癌农杆菌介导;愈伤组织诱导;不定根诱导;转基因效率;表达载体;转化液;除菌;带柄;生根;遗传;分化;携带;基因;转化;成功

年份：2023

摘要：本发明涉及一种基于西南桦叶片不定根发生的遗传转化方法，包括如下步骤：以西南桦带柄叶片为转化受体，对所述转化受体进行预培养；所述转化受体经预培养之后再用含有根癌农杆菌的转化液侵染；对侵染后的叶片进行共培养；清洗共培养后的叶片；对清洗后的叶片进行不定根诱导培养；其中所述根癌农杆菌中包含携带增强绿色荧光蛋白基因的表达载体。采用本发明的方法，无需经历愈伤组织诱导与分化等过程即可直接实现生根，大大缩短了转化周期；采用高效的清洗方式，增加了除菌力度，提升了西南桦转基因效率，从而成功实现根癌农杆菌介导的基于西南桦叶片不定根发生的遗传转化，遗传转化率可达到10％以上，具有周期短、转化率高且操作简单等优点。