文献类型：专利

中文题名：一种松材线虫RPA-Exo检测的引物探针组合、检测方法及应用

作者：吕全[1] 王慧敏[1] 吴啸林[1] 窦桂铭[1]

第一作者：吕全

机构：[1]中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所(国家林业和草原局世界自然遗产保护研究中心);

专利类型：发明专利

申请号：CN202410867092.7

申请日：20240701

申请人地址：100091 北京市海淀区东小府2号

公开日：20240927

代理人：刘化帅

代理机构：北京盛广信合知识产权代理有限公司

语种：中文

中文关键词：松材线虫;检测;引物;特异性和敏感性;筛选;松木;生物检测技术;等温扩增;即时检测;快速检测;快速提取;扩增效果;探针组合;引物探针;应用潜力;最佳引物;对引物;准确率;靶标;核酸;扩增;探针;样本;野外;基因;优化;应用

分类号：S85

年份：2024

摘要：本发明公开了一种松材线虫RPA?Exo检测的引物探针组合、检测方法及应用，属于生物检测技术领域。本发明以基因Syg2作为靶标进行引物和探针的设计，从6对引物中筛选出了扩增效果最佳的1组引物，并对反应温度进行了优化，建立了以syg2基因为靶标的松材线虫RPA?Exo快速检测方法。该方法具有良好的特异性和敏感性，最低检测限为1pg(10^?3ng)；在39℃条件下等温扩增20min即可完成对松材线虫的检测。以Chelex?100核酸快速提取方法从12份感病松木样本中提取的DNA，并采用上述筛选的最佳引物探针组合进行RPA?Exo扩增，只要40min左右，准确率高，具有一定的野外即时检测应用潜力。