文献类型：专利

中文题名：松材线虫的冷冻保存及解冻方法

作者：汪来发[1] 朴春根[1] 王曦茁[1] 朱天辉[1] 李永[1] 李沁[1] 郭民伟[1] 林彩丽[1] 田国忠[1]

第一作者：汪来发

机构：[1]中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所;

专利类型：发明专利

申请号：CN201110282637.0

申请日：20110922

申请人地址：100091 北京市海淀区东小府1号中国林科院森环森保所

公开日：20130828

代理人：余光军

代理机构：北京市德权律师事务所

语种：中文

中文关键词：松材线虫;冷冻保存;降温;预处理;降温速率;解冻方法;平衡处理;程序化;冷冻保护剂;繁殖能力;升温速率;存活率;线虫;液氮;株系;解冻;复苏;升温

年份：2013

摘要：本发明公开了一种松材线虫的冷冻保存及解冻方法，属于线虫的冷冻保存领域。本发明方法包括以下步骤：（1）预处理松材线虫悬液；（2）预处理后的松材线虫悬液中加入冷冻保护剂，平衡处理；（3）平衡处理后的松材线虫悬液程序化降温后冷冻保存；（4）解冻复苏；所述的程序化降温的程序如下：以1℃/min的降温速率将松材线虫悬液从4℃降温至-6℃；再以20℃/min的降温速率降温至-40℃；以10℃/min的升温速率升温至-20℃；最后以1-0.5℃/min的速率将松材线虫悬液降温至-45℃后投入液氮中保存。本发明冷冻保存及解冻方法能显著提高松材线虫的存活率和繁殖能力，能适用于不同株系松材线虫的冷冻保存。