文献类型：期刊文献

中文题名：柑橘叶点霉菌ISSR-PCR反应体系的优化

英文题名：Optimization of Inter-simple Sequence Repeat PCR Reaction System of Phyllosticta citricarpa

作者：王兴红[1] 李红叶[2]

第一作者：王兴红

机构：[1]中国林业科学研究院华北林业实验中心;[2]浙江大学农业与生物技术学院

年份：2016

卷号：31

期号：1

起止页码：123-127

中文期刊名：华北农学报

外文期刊名：Acta Agriculturae Boreali-Sinica

收录：CSTPCD;;北大核心:【北大核心2014】；CSCD:【CSCD2015_2016】；

基金：国家现代农业(柑橘)产业技术体系建设专项资金(CARS-27)

语种：中文

中文关键词：柑橘叶点霉菌;ISSR;单因素试验法;柑橘黑斑病

外文关键词：Phyllosticta citricarpa; Inter-simple sequence repeat; Single factor test; Citrus black spot

分类号：S435.79

摘要：为了获得最优柑橘黑斑病病原菌柑橘叶点霉菌ISSR-PCR反应体系,利用单因素试验法对反应体系中的5个因素(Mg2+、d NTP、引物、Taq DNA聚合酶和模板DNA)分别设置了不同的浓度梯度进行反应体系的优化。结果表明,在20μL反应体系中,含有1.5 mmol/L的Mg2+、0.15 mmol/L的d NTP、0.3μmol/L的引物、25 ng DNA模板、0.5 U Taq DNA聚合酶为最优。利用优化的ISSR-PCR反应体系对不同地理来源的21株柑橘叶点霉菌菌株进行扩增。结果表明,已建立的体系稳定可靠。柑橘叶点霉菌ISSR-PCR反应体系的建立为利用ISSR分子标记技术对柑橘叶点霉菌进行遗传分析奠定了基础。
In order to obtain the optimization of ISSR-PCR reaction system of Phyllosticta citricarpa（ Mc Alpine） van der Aa,the concentrations of five factors（ Mg2 ＋,d NTP,primers,Taq DNA polymerase,template） were respectively optimized by single factor test. The result showed that the optimized reaction system consisted of 1. 5mmol / L Mg2 ＋,0. 15 mmol/L d NTP,0. 3 μmol/L primers,25 ng template DNA,0. 5 U Taq DNA polymerase. The optimized ISSR-PCR reaction system was stable and credible by the amplification of 21 strains of P. citricarpa. The study would provide the basis for the genetic analysis of P. citricarpa.