文献类型：专利

中文题名：松材线虫的玻璃化冷冻保存及解冻复苏方法

作者：王曦茁[1] 张永安[1] 汪来发[1] 朴春根[1] 田国忠[1] 林彩丽[1] 李永[1]

第一作者：王曦茁

机构：[1]中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所;

专利类型：发明专利

申请号：CN201210424884.4

申请日：20121030

申请人地址：100091 北京市海淀区东小府1号

公开日：20130327

代理人：余光军

代理机构：北京市德权律师事务所

语种：中文

中文关键词：松材线虫;玻璃化冷冻保存;冷冻保存;混合物;解冻;冷冻保护剂;平衡处理;复苏;繁殖率;预处理;参数进行;存活率;保护剂;二甲基;卵黄;亚砜;液氮;株系;冷冻;筛选;平衡;优化

分类号：TS2

年份：2013

摘要：本发明公开了松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的玻璃化冷冻保存及解冻复苏方法，该方法包括以下步骤：(1)将松材线虫悬液与冷冻保护剂混合均匀得到混合物；将混合物进行平衡处理；(2)平衡处理后的混合物在液氮中冷冻保存；(3)解冻、复苏；其中，所述的冷冻保护剂是二甲基亚砜和卵黄。本发明对玻璃化冷冻保存方法中的各工艺参数进行了优化，筛选到了最适宜于松材线虫玻璃化冷冻保存的保护剂的种类、浓度以及包括预处理、平衡和解冻复苏在内的最适宜的处理方式。采用本发明方法冷冻保存松材线虫，冷冻后的松材线虫存活率高、冻后繁殖率高，能适用于松材线虫不同株系的冷冻保存。