文献类型：期刊文献

中文题名：油桐ISSR-PCR最佳反应体系的建立

英文题名：Establishment of Optimum ISSR-PCR Reaction System in Tung Oil Tree(Vernicia fordii)

作者：李鹏[1] 汪阳东[2] 陈益存[2] 张小平[1]

第一作者：李鹏

机构：[1]安徽师范大学生命科学学院;[2]中国林业科学研究院亚热带林业研究所

年份：2008

期号：2

起止页码：194-199

中文期刊名：林业科学研究

外文期刊名：Forest Research

收录：CSTPCD;;Scopus;北大核心:【北大核心2004】；CSCD:【CSCD2011_2012】；

基金：浙江省重大科技攻关项目"油茶油桐乌桕三种木本油料能源树种新品种选育及中试"(2006C12016)

语种：中文

中文关键词：油桐;ISSR-PCR;单因子试验;正交设计

外文关键词：Vernicia fordii; ISSR-PCR; single factor tests; orthogonal design;

分类号：S794.3

摘要：在油桐遗传多样性研究中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,综合采用单因子试验和正交设计两种方法对影响油桐ISSR-PCR反应结果的4个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引物)进行优化试验。单因子试验分别研究各因素对ISSR-PCR反应的影响,找出最佳反应水平。正交设计选用L9(34)方案,采用直观分析获得影响因素最佳反应水平。通过综合比较分析,最终建立了油桐ISSR-PCR反应的最佳反应体系,即在20μL反应体系中,Taq DNA聚合酶1.0 U,Mg2+2.0 mmol.L-1,dNTP 0.20 mmol.L-1,引物0.4μmol.L-1,1×PCR缓冲液,40 ng模板DNA。
To apply ISSR to genetic breeding of tung oil tree(Vernicia fordii),both the single factor test and the orthogonal diagram were used to optimize the ISSR amplification system of tung in four factors(Taq DNA polymerase,Mg2+,dNTP,primer) at three levels respectively.There were some differences between the results of the two methods.Through comprehensive analysis,a suitable ISSR-PCR reaction system was established: 20 μL reaction system containing 1.0 U Taq DNA polymerase,2.0 mmol·L-1 Mg2+,0.20 mmol·L-1dNTP,0....