文献类型：专利

中文题名：一种基于多重PCR的竹笋夜蛾幼虫物种快速鉴定方法

作者：耿显胜[1] 张威[1] 滕莹[1] 周卫青[1] 华克达[1] 李志红[1] 舒金平[1]

第一作者：耿显胜

机构：[1]中国林业科学研究院亚热带林业研究所;

专利类型：发明专利

申请号：CN202311207623.1

申请日：20230919

申请人地址：311400 浙江省杭州市富阳区大桥路73号

公开日：20240102

代理人：金兰

代理机构：重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙)

语种：中文

中文关键词：竹笋;夜蛾;夜蛾幼虫;测序序列;多重比对;快速鉴定;多重PCR;物种;生物工程技术领域;基因组提取试剂;多重PCR扩增;琼脂糖凝胶;通用引物对;提取总DNA;电泳分析;反向引物;技术要点;序列比对;组织研磨;灵敏度;变异区;通用型;研磨仪;测序;扩增;切取;匀浆

年份：2024

摘要：本发明公开了一种基于多重PCR的竹笋夜蛾幼虫物种快速鉴定方法，涉及生物工程技术领域，其技术要点为：收集受害竹笋内的夜蛾幼虫；使用研磨仪将切取的竹笋夜蛾组织研磨成匀浆，使用通用型基因组提取试剂盒提取总DNA；采用通用引物对LCO1490/HCO2198扩增竹笋夜蛾的COI基因片段；取6μL的PCR产物，进行琼脂糖凝胶进行电泳分析；PCR扩增为阳性的产物进行测序，测序序列使用NCBI数据库进行序列比对，确定测序序列所对应物种的名称；使用DNAMAN 9.0进行多重比对，依据多重比对的结果，选取变异区设计3条反向引物，用于多重PCR扩增。本发明建立了快速鉴定竹笋夜蛾幼虫的多重PCR技术，该技术具有很高的灵敏度和特异性，能够准确鉴定林间竹笋夜蛾的物种。