文献类型：期刊文献

中文题名：一种适合油桐种仁蛋白质分离的双向电泳技术体系

英文题名：An Improved System of Two-dimensional Electrophoresis for the Tung Tree Seed Protein Separation

作者：占志勇[1] 陈益存[1] 韩小娇[1] 崔琴琴[1] 汪阳东[1]

第一作者：占志勇

机构：[1]中国林业科学研究院亚热带林业研究所

年份：2012

卷号：25

期号：6

起止页码：745-750

中文期刊名：林业科学研究

外文期刊名：Forest Research

收录：CSTPCD;;Scopus;北大核心:【北大核心2011】；CSCD:【CSCD2011_2012】；

基金：国家林业局"948"引进项目"木本油料植物油脂合成基因高通量分析技术引进"(2009-4-23)

语种：中文

中文关键词：油桐;双向电泳;蛋白质组学

外文关键词：tung trees ; two-dimensional electrophoresis （2-DE） ; proteomics

分类号：S794.3

摘要：为奠定油桐蛋白质组学研究的基础,针对影响油桐种仁蛋白质分离效果的几个重要因素进行单因素优化实验,建立了油桐种仁蛋白质组分离效果良好的双向电泳技术平台。实验结果显示:采用TCA-丙酮结合酚抽法提取的油桐种仁蛋白质,经裂解液(7 mol.L-1尿素,2 mol.L-1硫脲,4%CHAPS,65 mmol.L-1DTT,2%IPG buffer)裂解之后,上样700μg聚焦70 000 Vh,经过SDS-PAGE电泳(分离胶浓度15%,恒功率5 W,电泳时间8 h)后有良好的分离效果,能满足开展后续蛋白质组学研究的实验要求。
In order to construct a basis for the tung trees protein research, some key factors which could impact on the results of the protein separation were studied and an improved system of two-dimensional electrophoresis were built successfully including the suitable protein extraction method （TCA-acetone combined with phenol）, the solu- tion buffer （7 mol· L-1 urea, 2 tool · L-1 thiourea, 4% CHAPS, 65 mmol· L-1 DTT and 2% IPG buffer）, the volumes of loading protein （700 μg） in IEF and the better conditions for the SDS-PAGE （ 15% separation gels and constant 5W for 8 h）.