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一种发根农杆菌介导的栓皮栎遗传转化方法
文献类型:专利
中文题名:一种发根农杆菌介导的栓皮栎遗传转化方法
作者:朱景乐[1] 于昕冉[1] 朱海洋[1] 丁欢欢[1] 张延华[1] 陈薇薇[1] 杨灿灿[1] 冯亚鑫[1]
第一作者:朱景乐
机构:[1]中国林业科学研究院经济林研究所;
专利类型:发明专利
申请号:CN202411703894.0
申请日:20241126
申请人地址:450000 河南省郑州市金水区纬五路3号
公开日:20250214
代理人:王亚超
代理机构:广州大象飞扬知识产权代理有限公司
语种:中文
中文关键词:发根农杆菌介导;栓皮栎;遗传转化;暗培养;发根农杆菌;侵染;外植体;扩大培养;幼苗;幼嫩茎段;带叶;形态学观察;发根;切取;单菌落;菌体;植体;摇床;固体培养基;光照培养
分类号:S43
年份:2025
摘要:本发明公开了一种发根农杆菌介导的栓皮栎遗传转化方法,包括首先通过栓皮栎种子培育栓皮栎幼苗,分别切取栓皮栎幼苗不同部位作为侵染外植体;将发根农杆菌菌种复苏,并对复苏的发根农杆菌进行扩大培养制得侵染液,发根农杆菌为K599,载体上具35S::Ruby报告基因;将不同部位的外植体分别利用发根农杆菌在切口处进行侵染,并种在蛭石基质中;将分别侵染后的外植体进行暗培养与光照培养;将经过培养的外植体进行形态学观察与取样检测,确定培育状态最佳的外植体及对应从栓皮栎幼苗上切取部位。本发明通过以发根农杆菌为介导,以栓皮栎幼苗幼嫩茎段为外植体进行侵染,获得转基因毛状根,为后期栓皮栎功能基因挖掘及基因编辑研究的提供基础。
参考文献:
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