文献类型：专利

中文题名：一种从基因组DNA中获得侧翼序列的方法

作者：张立峰[1] 韩素英[1] 齐力旺[1] 李水根[1] 张俊红[1]

第一作者：张立峰

机构：[1]中国林业科学研究院林业研究所;

专利类型：发明专利

申请号：CN201310452575.2

申请日：20130925

申请人地址：100091 北京市海淀区颐和园后中国林科院林业研究所

公开日：20171121

代理人：关畅

代理机构：11245 北京纪凯知识产权代理有限公司

语种：中文

中文关键词：侧翼序列;基因组DNA;引物;特异性扩增;特异性引物;方向一致;已知序列;扩增;成功率;耗时;简易

年份：2017

摘要：本发明公开了一种从基因组DNA中获得侧翼序列的方法。该方法包括如下步骤：1）根据基因组DNA上的已知序列设计三条方向一致用于扩增侧翼序列的特异性引物，按距离侧翼序列由远及近的顺序将其依次记为GSP1、GSP2和GSP3；2）以基因组DNA为模板，以引物SAP（序列1?15中任一）和所述GSP1进行第一轮PCR扩增，得到PCR产物1；3）以所述PCR产物1为模板，以引物SEP（序列16和17）和所述GSP2进行第二轮PCR扩增，得到PCR产物2；4）以所述PCR产物2为模板，以引物SNP（序列18）和所述GSP3进行第三轮PCR扩增，得到PCR产物3，从而获得所述侧翼序列。本发明所提供方法具有如下优点：操作简易、高特异性扩增、高成功率、容易得到大的片段、耗时短等。