文献类型：专利

中文题名：一种基于双酶切的简化基因组测序文库的构建方法

作者：李发根[1] 甘四明[1] 贾翠蓉[1] 翁启杰[1] 周长品[1] 朱显亮[1]

第一作者：李发根

机构：[1]中国林业科学研究院热带林业研究所;

专利类型：发明专利

申请号：CN201910665025.6

申请日：20190723

申请人地址：510520 广东省广州市天河区广汕一路682号

公开日：20230606

代理人：吕纪涛

代理机构：北京高沃律师事务所

语种：中文

中文关键词：构建;测序文库;连接产物;基因组;双酶切;引物;限制性内切酶MspI;基因组DNA;测序技术;磁珠分选;接头序列;扩增产物;酶切产物;全基因组;上游引物;下游引物;混合物;酶切;双轮;开发

年份：2023

摘要：本发明提供了一种基于双酶切的简化基因组测序文库的构建方法，属于全基因组重测序技术领域，包括利用限制性内切酶MspI和MseI对基因组DNA进行酶切，将接头序列分别连接到酶切产物上，得到连接产物；将连接产物进行等质量混合，将得到的混合物进行双轮磁珠分选，得到350bp的片段；以得到的片段为模板，用引物对进行PCR扩增，将得到的扩增产物纯化后，构建得到基于双酶切的简化基因组测序文库；所述引物对的上游引物的序列如SEQ ID No.1所示，下游引物的序列如SEQ ID No.2所示。采用本发明提供的构建方法最终开发的SNP位点有225,744个，提高了SNP位点的开发。