文献类型：专利

中文题名：白蜡虫抗冻蛋白基因ep?afp及其编码的氨基酸序列

作者：杨璞[1] 于淑惠[1]

第一作者：杨璞

机构：[1]中国林业科学研究院资源昆虫研究所;

专利类型：发明专利

申请号：CN201610546589.4

申请日：20160712

申请人地址：650224 云南省昆明市盘龙区白龙寺

公开日：20161116

代理人：杨宏珍

代理机构：53115 昆明今威专利商标代理有限公司

语种：中文

中文关键词：抗冻蛋白基因;差示扫描量热法;构建重组质粒;基因工程领域;阳性重组克隆;原核表达载体;分子生物学;氨基酸序列;植物抗寒性;表达菌株;纯化蛋白;东北地区;候选基因;极端低温;抗冻蛋白;目的片段;同源重组;原核表达;重组质粒;密码子;构建;抗冻;蛋白;烟草;转入;转化;应用;分析

年份：2016

摘要：本发明为白蜡虫抗冻蛋白基因ep?afp及其编码的氨基酸序列，涉及分子生物学以及基因工程领域。本发明以我国东北地区耐极端低温的白蜡虫为材料，通过PCR扩增得到目的片段，连接到pGEM?T载体上构建重组质粒，获得ep?afp基因的阳性重组克隆；利用同源重组构建原核表达载体pET?22b/afp，重组质粒转入BL21表达菌株中进行原核表达，利用差示扫描量热法分析纯化蛋白的热滞活性为0.91℃。根据烟草密码子修改后的白蜡虫抗冻蛋白基因序列作为提高植物抗寒性转化的重要候选基因。本发明的白蜡虫抗冻蛋白ep?afp是具备抗冻作用的新的蛋白，具有很大的应用价值。